生化上的反应曲线整个生化反应过程的记录，通过查看反应曲线我们可以知道这个结果是否可靠，也可以发现一些仪器故障（试剂针加样不足、冲洗机构冲洗问题），也能提醒我们光源灯能量不足（俗称，换灯泡），也能查看速率法项目是不是底物耗尽。
那么，到底怎么去看这个反应曲线呢？
日立7180/7600 P模块仪器时序图
理论知识：
一条反应曲线包含两个最基本的元素：横坐标、纵坐标。横坐标是测光点（也是反应时间）；纵坐标是仪器分光光度计测量的吸光度（也叫光密度）。这两个元素特别重要。
这个图是日立7600P模块上的反应曲线，几个单词的意义如下：
Point：横坐标的测光点， 在这个机器上点与点之间的时间间隔是 18 秒， 0.3 分钟
Abs：测光点的吸光度值，日立仪器将吸光度值放大 10000 倍后输出；日立机器最大吸光度线性可以到 32000 ，最高可以显示到 40000 （仪器认为大于 32000 的吸光度仅供参考）
CONC.：浓度值，也就是仪器测量的结果
Prozone：前带检查：在免疫反应中，样品的浓度变高，标准曲线的吸光度会从升高转为降低（区域现象或前带现象）。吸光度转为降低后，高浓度样品有可能会被误认为是低浓度的，所以需要检查，前带现象的检查方法中有抗原再添加法和反应速度比法。全部的分析法均可适用。如不进行检查，在应用程序（分析）画面的前带界限值处输入“ -32000, 下限”。
注意上段话中，全部分析方法均可适用，也就是说不单单可以用在抗原抗体反应中，还可以用到其他非抗原抗体反应中，如GLU、 UA 等项目
Limit：仪器分析参数里的 Abs Limit ，只适用于速率 A 项目。仪器在输入的反应界限吸光度处，加入样品的浊度，进行反应界限吸光度的修正，反应界限的吸光度只用主波长的吸光度来进行检查。
修正后的反应界限吸光度＝反应界限吸光度输入值＋ (L1-Lb)
L1 ：在测光点 1 处样品主波长吸光度
Lb ：在测光点 1 处试剂空白的 波长吸光度
L1 -Lb≤ 0 时，反应界限吸光度不做修正
图中阴影区域：只有速率A的反应曲线才会有阴影，所以当看到反应曲线存在阴影时，可以反推这个项目的分析方法是速率 A
当分析方法是速率A时，仪器还会进行反应直线性的检查：吸光度变化与时间的关系必须呈线性，为此，线性检查超出界限值时，仪器会有数据报警 F 或者 W （根据反应读点的多少，区分显示）
当分析方法是速率A时，仪器还会进行反应界限吸光度的检查，即上面提到的 Limit ：速率法的分析项目中，浓度或活性值超过可定量范围时，不能得到准确数据。为此设定了吸光度上、下限值来进行检查，当超出吸光度界限时，仪器会有数据报警 I 或 J 或 K
仪器的曲线界面包含了大量信息，还包括试剂批号、分析模块、第一次测量还是复查测量等。生化仪的本质就是分光光度计，遵循朗伯比尔定律。空气对光路是漫反射，这一点也很重要。
实际应用：
①
这是两点终点法的胆红素，乍一看好像存在跳点的现象，实际上并没有跳点，因为：曲线的纵坐标吸光度只有323-517大约 200 的跨度，所以说这条曲线没有问题，是标准的胆红素反应曲线
②
上面两张图片是重度脂血的标本，测量总胆固醇和甘油三酯。没有设置前带参数，所以没有前带报警标识，但是在Range处设置了线性，所以报警超线性（这个线性是指试剂的线性范围）。从反应曲线上看，仪器计算的结果应该比真实值要低，所以这个标本要稀释复查
③
上面三张图片，几乎所以速率A项目都报警线性不良，提示光能量不足。为什么是光能量不足，而不是其他的原因呢？因为不是发生在单一项目上，如果发生在单一项目上，可能是试剂出问题了。虽然 GLU （两点终点项目）没有任何报警，但是查看反应曲线，也存在跳点，并且用来计算结果的 33 34 点不应该下降，但是由于光源的原因吸光度减低，这样造成的后果就是结果和真实值相比偏低。
遇到这样的图片，查看灯泡的更换记录，是不是超过了规定的时间，更换灯泡以后要执行一次CELL BLANK。
还要强调的一个重点就是，光源出问题的时候，并不是只体现在酶类项目或者是速率A项目上，可以体现在所有的项目上；由于速率 A 会严格验证测光点的线性度，所以仪器会有线性不良的报警，所以给我们的假象就是只发生在速率 A 项目上。两点重点的项目需要根据曲线去确认结果是不是可靠
④
这两张图片能发现什么？两点终点法的尿酸
观察正常曲线可以发现R1阶段的吸光度是没有特别大的变化的，在加入 R2 之后吸光度才会变化，直到反应终点。而异常曲线恰恰相反， R1 阶段吸光度上升， R2 阶段吸光度没有变化。
通过曲线，可以推测出来加错试剂了：把试剂2加到了试剂 1 里面，并且加入的量还不少（因为在 13 14 15 点几乎达到了反应终点；并且 R2 加入以后不再反应）甚至是整个 R2 当作 R1 加进去的。
在尿酸这个曲线里插入两个知识点：在反应体系中，随着R2的加入，瞬间将反应体系稀释掉了， R2 充当了一次稀释液的作用；测光点之间间隔 18 秒，这 18 秒可以什么也不发生，也可以发生很多事情。
在异常曲线上，P16到 P17 吸光度骤降，就是因为 R2 的稀释作用；
而在正常曲线上，P16到 P17 吸光度没有骤降反而上升，就是因为随着 R2 的加入反应启动， 18 秒的时间内生成了测量物质，导致的吸光度上升。
⑤
具体情况是这样的，好多项目都报警F线性不良，结果也严重失控，决定定标，定标后两次的重复性特别不好。可以说仪器完全不在状态。恰巧 BUN 这张曲线在 5 和 6 两点间发生了跳点，这两点恰巧存在搅拌棒搅拌过程，由此联想到仪器硬件问题，查看仪器搅拌棒冲洗站后发现， 3 号针处比色杯溢水，再观察后发现 8 号针里面堵住了一只苍蝇，导致 8 号针失效，不能完全把水抽出去，消除故障后，执行 cell blank ，再执行定标，所有项目结果在控。
（这只苍蝇哪里来的？不可思议吧，当时的时间地点是北方的10.1，外面冷、室内暖和，苍蝇扎堆往室内飞，恰巧仪器是关机状态，苍蝇顺着血腥味跑到了比色杯中）
⑥
这条曲线，存在严重的跳点（25到 28 点），所以结果不可靠，必须查找跳点的原因，结果需要复查，不多叙述
⑦
这是个尿液淀粉酶，仪器报警K：测光点内的吸光度超过了该样本 ABS LIMIT ， 32256 。但是，这个结果是可信的，在测光点区域内所有点成线性，只不过超过了设定的反应度界限（日立最大只能设置 32000 ，无法设置更大的），官方说明书上说到，这种结果作为参考值输出。但是我们从挽救病人生命的角度讲，越早发结果越好
⑧
这是生化仪上测量糖化血红蛋白的HB的曲线，仪器报警 Z ，结果也是异常增高，不可靠。
查看曲线发现吸光度大于40000，很奇怪。前面提到，空气对光线是漫反射，导致最后的吸光度很大，这个曲线就是这样原因：当时试剂上机的时候没有注意观察试剂瓶有没有泡沫，试剂瓶内存在大量泡沫，而试剂针探测液面用的是电容原理，这些泡沫能够形成足量的电容，欺骗试剂针吸到了试剂，但是试剂吸入的量是小于仪器要求最低反应体积 150ul 的
⑨
最后，用一张最简单的曲线结尾
相信这张图片是最耳熟能详的了：底物耗尽。好像底物耗尽的概念是从肝功能ALT AST引申出来的，确实是这两个项目最容易发生底物耗尽，和试剂的检测原理有关系，粗略一句话，降反应发生底物耗尽的概率比升反应发生的底物耗尽要大很多。
至今，我没有遇到过GGT发生底物耗尽
来源：生化笔记
