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众所周知，哺乳动物细胞作为蛋白的表达系统具有糖基化、乙酰化、硫酸化、硫酸化等翻译后修饰。而蛋白翻译后修饰，如糖基化修饰，会直接影响蛋白在体内的半衰期及稳定性和生物学活性、影响配体识别及结合，影响其免疫原性，影响胞间作用等等功能。 目前，哺乳动物细胞已被广泛用于重组蛋白、疫苗、抗癌试剂及其他临床相关的药物的生产中。 CHO细胞、BHK细胞、Sp2/0等细胞常被用于制备生物制药。然而这些小鼠来源的细胞与HEK293细胞相比，缺乏人的细胞翻译后修饰系统，因此与人源系统表达的蛋白有差异。目前，HEK293细胞被广泛用于生产蛋白、疫苗、抗癌试剂及重组腺病毒包被等。
1) 转染效率高； 2) 可悬浮培养用于大规模表达； 3) 表达蛋白结构最接近其在人体内构象； 4) HEK293细胞在培养体系中能够快速增长，高密度培养。 5) HEK293细胞与神经元细胞一样，对外界微环境较为敏感，利用这一特点，可用于药物发现及细胞毒性测试。 温馨提示：接下来将有一群HEK293细胞系向您狂奔而来， 请注意防护~
HEK293细胞系概览 （
（点我看大图） 如您所见，小编在得到读者想要系统了解HEK293细胞系的愿望后，博览古今（不要脸 接下来，小编将主要按照该篇文献报道中的顺序给大家分享现有的HEK293细胞系的现状。 1973年，最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细胞中。将人的胚胎肾细胞中转化入人5型腺病毒DNA片段，得到的细胞即为HEK293细胞。
HEK293细胞，何许人也？ 注：以下细胞系介绍中，HEK293细胞简称为293细胞。 293T细胞 293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株，即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增，促进蛋白的表达。 293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产，还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产，如腺病毒及其他哺乳动物病毒。 293T/17细胞 293T细胞中共转染入pBND 和 pZAP 质粒，获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外，还具有高转染性的特点。 293T/17 SF细胞 293T/17 SF细胞系指的是在293T细胞中转入EBV基因形成的转化细胞系，该细胞系主要用于细胞的瞬时转染及蛋白表达。 293H细胞 293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。另外，该细胞系贴附力好，而被用于噬菌斑检测等应用。 293E细胞 293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系，该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV复制起点（oriP）的重组表达质粒，能够在H293E细胞中复制，并实现蛋白的高效表达。 293-6E细胞 293-6E细胞则是在293-H细胞中插入截短过后的EBNA-1基因的细胞系，其能够在无血清培养基中高表达生产蛋白及病毒载体。 293F细胞 293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。 293FT细胞 293FT细胞则是在293F细胞系中插入pCMVSPORT6TAg.Neo 质粒的转化细胞系，能够快速增值，易转染，其能够用于慢病毒载体的生产。 293FTM细胞 293FTM细胞则是来源于Flp-InTMT-RETM293细胞，该细胞系中转染了ecotropic receptor质粒及MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)报告质粒，该细胞系主要用于蛋白互作的筛选。 293S细胞 293S细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。 293SG细胞 将293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理，蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系即为293SG。 该细胞系缺乏乙酰氨基葡萄糖转移酶I活性，因此可促进蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修饰。此外，该细胞系中具有四环素表达抑制基因，可用于四环素诱导的蛋白表达研究。 这类细胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。 293SGGD细胞 293SGGD细胞系则指的是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系，其主要用于糖基化工程研究中。 完 本篇文章仅仅是汇总了常见的HEK293细胞系， 如果您对某类细胞系感兴趣，想要更加深入的了解， 请随时联系小编，小编愿与您共同探讨学习，进步~~ PS：特别感谢北京义翘神州余博士对于本篇文章内容指导帮助。 参考文献： 1：Lin Y C, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767. 2：Hu J, Han J, Li H, et al. Human Embryonic Kidney 293 Cells: A Vehicle for Biopharmaceutical Manufacturing, Structural Biology, and Electrophysiology[J]. Cells Tissues Organs, 2018, 205(1): 1-8. |
最全HEK293细胞系汇总：这些HEK293细胞系，您都了解吗？
青菜萝卜
收藏于 : 2019-06-25 21:40 被转藏 : 1
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